معلومة

عندما يتم قياس طول التيلومير ، هل الطريقة التي يتم إجراؤها على مجموعة من الخلايا تعطي متوسطًا؟

عندما يتم قياس طول التيلومير ، هل الطريقة التي يتم إجراؤها على مجموعة من الخلايا تعطي متوسطًا؟



We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

ما هي الطرق المستخدمة في قياس التيلوميرات في البشر أو الحيوانات؟

هل يمكن أن يتم ذلك في خلية فردية؟

هل تم طرح الشواغل التالية ومعالجتها من قبل:

ماذا لو كان هناك تباين طبيعي في طول التيلومير على أساس خلية بخلية وهناك طرق مختلفة (تمرين شاق ، إلخ) تمارس ضغط الاختيار على طول التيلومير ، فعندئذ إذا كانت طريقة القياس تتضمن بطريقة ما خلايا متعددة لديك تأثير زيادة متوسط ​​الطول بينما حدث شيء آخر بالفعل. نتج عن كل هذه الدراسات أن طول التيلومير زاد.


يمكن قياس التيلومير باستخدام اختبار تدفق الأسماك. يتم إدخال العلامات الفلورية التي تربط الحمض النووي إلى نواة الخلية ، ومن ثم يمكن حساب هذه العلامات باستخدام طريقة تسمى قياس التدفق الخلوي.

يمكن أن يتم ذلك في خلية واحدة

لست متأكدًا من فهمي للجزء الأخير من السؤال ، لكن يمكنني القول أنه إذا زاد متوسط ​​حجم الهاتف عن بُعد في حجم عينة معين ، فلن يستنتج العلماء أي شيء بناءً على تلك البيانات.

إذا كان هناك استنتاج علمي حول حجم التيلومير فيما يتعلق بالضغوط الانتقائية الخارجية ، فستكون هناك بيانات ذات دلالة إحصائية تفسر بشكل صحيح الاختلافات التي لوحظت في الخلايا المختلفة.


طريقة PCR كمية لقياس طول التيلومير المطلق

نصف طريقة بسيطة وقابلة للتكرار لقياس طول التيلومير المطلق (aTL) باستخدام تفاعل البلمرة المتسلسل الكمي في الوقت الحقيقي (qPCR). تعتمد هذه الطريقة على طريقة Cawthon للقياس النسبي لطول التيلومير (TL) ولكن تم تعديلها عن طريق إدخال معيار أوليغومير لقياس aTL. تصف الطريقة معايير oligomer ، وتوليد المنحنى القياسي والحسابات المطلوبة لحساب aTL من بيانات qPCR. يتم وصف الضوابط الضرورية وخصائص الأداء للمقايسة بالتفصيل ومقارنتها بالنسبة للطرق الأخرى لقياس TL. يتم توفير النتائج النموذجية لهذا الاختبار لمجموعة متنوعة من عينات الأنسجة البشرية بالإضافة إلى جدول زمني لاستكشاف الأخطاء وإصلاحها. تسمح هذه الطريقة بقياس الإنتاجية العالية لـ aTL باستخدام كميات صغيرة من الحمض النووي مما يجعلها قابلة للدراسات الوبائية الجزيئية. مقارنةً بمقايسات TL qPCR التقليدية النسبية ، تتيح طريقة aTL الموصوفة في هذا البروتوكول مقارنة مباشرة أكثر للنتائج بين التجارب داخل المختبرات وفيما بينها.


خلفية

من المعتقد على نطاق واسع أن الإناث لديها تيلوميرات أطول من الذكور ، على الرغم من أن نتائج الدراسات كانت متناقضة.

أساليب

لقد أجرينا مراجعة منهجية وتحليلات تلوية لاختبار الفرضية القائلة بأن لدى الإناث تيلوميرات أطول من الذكور وأن هذا الارتباط يصبح أقوى مع تقدم العمر. أجريت عمليات البحث في EMBASE و MEDLINE (بحلول نوفمبر 2009) وتم الحصول على مجموعات بيانات إضافية من محققي الدراسة. قامت دراسات الملاحظة المؤهلة بقياس التيلوميرات لكل من الإناث والذكور من أي عمر ، وكان حجم عينة لا يقل عن 100 وتضمين مشاركين ليسوا جزءًا من مجموعة مريضة. حسبنا تقديرات موجزة باستخدام التحليلات التلوية للتأثيرات العشوائية. تم التحقيق في عدم التجانس بين الدراسات باستخدام تحليل المجموعة الفرعية والانحدار التلوي.

نتائج

أظهرت التحليلات التلوية من 36 مجموعة (36230 مشاركًا) أنه في المتوسط ​​كان للإناث تيلوميرات أطول من الذكور (فرق معياري في طول التيلومير بين الإناث والذكور 0.090 ، 95٪ CI 0.015 ، 0.166 مُعدل حسب العمر). كان هناك القليل من الأدلة على أن هذه الارتباطات تختلف حسب الفئة العمرية (ع = 1.00) أو نوع الخلية (ع = 0.29). ومع ذلك ، فإن حجم هذا الاختلاف يختلف باختلاف طرق القياس ، مع وجود لطخة جنوبية فقط ولكن لا يظهر اختلاف كبير في تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي ولا Flow-FISH. لم يترافق هذا الاختلاف مع خطأ القياس العشوائي.

الاستنتاجات

يكون طول التيلومير عند الإناث أطول من الذكور ، على الرغم من أن هذا الاختلاف لم يتم العثور عليه بشكل عام في الدراسات التي لم تستخدم طرق لطخة الجنوب. مطلوب مزيد من البحث حول تفسيرات الاختلافات المنهجية.


التيلوميرات في الإجهاد

تحمي التيلوميرات سلامة الكروموسومات. تصبح أقصر مع كل انقسام خلوي في معظم الخلايا لأن الإنزيم تيلوميراز غير نشط في الغالبية العظمى من الخلايا البشرية [10]. يمكن للمرء أن يقول إنهم "يضحون" بأنفسهم. خاصة وأن فقدان تسلسل تيلومير ليس أمرًا بالغ الأهمية بالنسبة للحالة الأيضية الحالية للخلية مثل فقدان تسلسل تشفير الحمض النووي للبروتين. وتشمل الوظائف الأخرى للتيلوميرات منع الكروموسومات من الانضمام أو التواجد المعترف بها على أنها فواصل مزدوجة الشرائط من الحمض النووي ، والتي بدورها تنبه آليات إصلاح الحمض النووي [11]. ومع ذلك ، مع مرور الوقت ، يتناقص طول التيلومير في الخلايا الطبيعية حتى تصبح أقصر من أن تلعب دورها وتحافظ على قدرة الخلايا على الانقسام. هذا ينتج عن الشيخوخة الخلوية التي تعد أحد الأسباب الرئيسية للشيخوخة والاضطرابات المرتبطة بالشيخوخة [12] المرتبطة بمشكلة نهاية النسخ المتماثل (حد Hayflick) [13].

يتناقص تعبير ونشاط التيلوميراز في الخلايا البشرية مع تقدم العمر [14]. ومع ذلك ، فهي ظاهرة فردية ويرتبط معدل استنزاف التيلومير ، من بين أمور أخرى ، بالقدرة على التغلب على الإجهاد. كما هو مقترح ، فإن النشاط البدني (يُنظر إليه على أنه أحد الطرق الرئيسية لتخفيف مستوى التوتر) يرتبط بالشيخوخة الصحية وتقليل خطر الإصابة بالعديد من الاضطرابات المزمنة ، ربما بسبب استعادة التيلومير [15 ، 16]. على المستوى الخلوي ، يشير الإجهاد إلى العوامل التي يمكن أن تؤثر على عملية التمثيل الغذائي أو يمكن أن تلحق الضرر بالخلية. ومع ذلك ، وبغض النظر عن المستوى ، فإن الإجهاد يتراكم تدريجياً مع تقدم العمر ، وقد يؤثر سلبًا على صحة الفرد ورفاهيته. الأهم من ذلك ، تبين أن مضادات الأكسدة تؤخر ظهور شيخوخة الأوعية الدموية بطريقة تعتمد على التيلوميراز. في دراسة في المختبر ، تبين أن أنواع الأكسجين التفاعلية (ROS) تقلل من مستوى البروتين النووي hTERT (الإنزيم العكسي للتيلوميراز البشري) (وحدة التيلوميراز الفرعية الرئيسية) ونشاط الإنزيم تيلوميراز في الخلايا البطانية ، والذي أعقبه تطور النمط الظاهري الشيخوخة. . في الوقت نفسه ، أدى احتضان مضادات الأكسدة N-acetylcysteine ​​إلى منع هذا التصدير النووي لـ hTERT إلى العصارة الخلوية ، مما يشير إلى دوره في الاستجابة للضغط [17]. وقد ثبت أن أحد مضادات الأكسدة الأخرى المعروفة ، وهو التوكوفيرول ، يثبط تقصير التيلومير ويحتفظ بنشاط التيلوميراز في الخلايا البطانية الوعائية الدقيقة بالدماغ [18]. وبالمثل ، فقد تبين أن مستخلص جينكو بيلوبا (ذو إمكانات عالية لمضادات الأكسدة) يؤخر ظهور الشيخوخة من خلال تنشيط الإنزيم تيلوميراز عبر مسار إشارات PI3k / Akt [19 ، 20]. الأهم من ذلك ، أن الإجهاد المزمن يؤدي إلى زيادة إفراز الكورتيزول القادر على قمع تنشيط التيلوميراز في جهاز المناعة ، وبالتالي تعزيز استنزاف التيلومير [21].

الحقيقة هي أن الشيخوخة مصحوبة بتآكل التيلومير ، على الرغم من أن معدلها غير متجانس للغاية بين الأفراد ، وأنواع مختلفة من الخلايا ولكن أيضًا كروموسومات مختلفة [22]. يؤدي الجانب الأخير بشكل خاص إلى استنتاج مفاده أن الخلايا يمكن أن تخضع للشيخوخة قبل الأوان ، حتى عندما يكون متوسط ​​طول التيلومير "طبيعيًا" ، لكن بعض نهايات الكروموسوم المحددة قصيرة للغاية. نظرًا لوجود بعض المسارات الكيميائية الحيوية الشائعة للشيخوخة والاستجابة للضغط وتآكل التيلومير ، فإننا نعتقد أن نهايات الكروموسوم هي علامات إجهاد حساسة للغاية ومؤشرات موثوقة لشيخوخة الخلايا. ومع ذلك ، يبدو أن الطريقة الوحيدة للاعتراف بطول التيلومير كعلامة الشيخوخة / الشيخوخة / التعرض للإجهاد هي تقييم معدل الطول / الاستنزاف للكروموسومات الفردية الفردية وليس قياس الطول الكلي للتيلومير في المتوسط.

تم عرض تقرير مهم آخر بواسطة Garrett-Bakelman وآخرون ، الذين أظهروا دراسة مرتبطة بالتعرض لانخفاض الجاذبية. كما هو موضح ، فإن رائد الفضاء (سكوت كيلي) ، الذي قضى ما يقرب من عام في محطة الفضاء الدولية ، قد عانى من بعض المتلازمات الحادة (انخفاض كتلة الجسم ، عدم الاستقرار في الجينوم ، تورم الأوعية الدموية الرئيسية ، تغيرات في شكل العين ، تغيرات الأيض ، الالتهاب والتغيرات في الميكروبيوم الخاص به) ولكن أيضًا تطويل التيلومير بشكل كبير. الأهم من ذلك ، أن الكروموسوم ينتهي مرة أخرى بعد هبوط رائد الفضاء وعاد إلى مستويات الاختبار المبدئي تقريبًا في غضون 6 أشهر بعد عودته إلى الأرض. ومع ذلك ، لوحظ زيادة عدد التيلوميرات القصيرة ، ولا يزال التعبير عن بعض الجينات معطلاً. في الوقت نفسه ، تمت مراقبة شقيقه التوأم المتطابق (لم يقض الوقت في الفضاء) كمرجع يظهر عدم وجود تغييرات كبيرة في طول التيلومير [23]. توضح هذه الحالة مدى تعقيد تنظيم التيلومير.


أساليب

الموضوعات والضوابط

دراسة صحة الرئة (LHS). استخدمت الدراسة البيانات السريرية والمواد البيولوجية التي تم الحصول عليها في دراسة صحة الرئة (LHS) ، وهي تجربة سريرية برعاية المعهد الوطني للقلب والرئة والدم. بعد استلام الموافقة الخطية المستنيرة ، سجل LHS مبدئيًا 5887 مدخنًا ، تتراوح أعمارهم بين 35 و # x0201360 عامًا مع وجود قيود خفيفة إلى متوسطة على تدفق الهواء (يُعرّف على أنه نسبة حجم الزفير القسري في ثانية واحدة (FEV1) إلى السعة الحيوية القسرية (FVC) & # x022640.70 و 55 & # x0003cFEV1& # x0003c90 & # x00025 المتوقعة) عبر 10 مراكز في أمريكا الشمالية [15]. الأفراد الذين لديهم تاريخ من السرطان (باستثناء سرطان الجلد الموضعي أو سرطان الخلايا القاعدية للجلد) ، احتشاء عضلة القلب (في العامين الماضيين) ، الذبحة الصدرية ، قصور القلب ، السكتة الدماغية (في العامين الماضيين) ، الفشل الكلوي ، الأنسولين- تم استبعاد الإصابة بمرض السكري أو تليف الكبد أو أمراض الكبد الخطيرة الأخرى أو الانسداد الرئوي أو اضطرابات الجهاز العصبي المركزي أو الزرق ضيق الزاوية أو أي أمراض رئيسية أخرى يمكن أن تضعف المتابعة [16].

خلال السنوات الخمس الأولى من المتابعة ، تم تقييم وظائف الرئة وحالة التدخين لدى المشاركين سنويًا. تم تصنيف المشاركين على أنهم تاركين مستمرين إذا تم التحقق من صحتهم على أنهم غير مدخنين في كل زيارة سنوية. المشاركون الذين كانوا مدخنين في كل زيارة سنوية كانوا مدخنين مستمرين. أولئك الذين اختلف سلوكهم مع التدخين تم تصنيفهم على أنهم تاركين متقطعين. في العام الخامس ، قدم 4803 مشاركًا عينات دم (تمثل 89 & # x00025 من المشاركين المؤهلين). تم فصل عينات الدم إلى الأجزاء المكونة لها وتم تخزينها في مجمدات & # x0221270 & # x000b0C حتى الاستخدام. ثم تمت متابعة المشاركين في الدراسة بشكل سلبي حتى نهاية عام 2001 لمتابعة متوسطها 7.5 سنوات من تاريخ بزل الوريد لدراسة الإغلاق. أثناء المتابعة ، تم تسجيل الحالة الحيوية للمشاركين ودخولهم المستشفى. قام مجلس الوفيات والمراضة بمراجعة جميع سجلات المرضى بما في ذلك شهادات الوفاة وحسابات شهود العيان وسجلات التشريح وملخصات المقابلات مع الأطباء المعالجين وسجلات الاستشفاء وتحديد سبب الوفيات لجميع المتوفين. تم استكمال هذه البيانات بمؤشر الوفيات الوطني الذي قدم تاريخ وسبب الوفاة لجميع المشاركين في الدراسة الأمريكية [16]. تم تجميع نقاط نهاية الوفيات في: أمراض القلب التاجية ، وأمراض القلب والأوعية الدموية (والتي تشمل أيضًا أمراض القلب التاجية) ، وسرطان الرئة ، وجميع أنواع السرطان (بما في ذلك سرطان الرئة) ، وأمراض الجهاز التنفسي باستثناء سرطان الرئة ، وأمراض أخرى وغير معروفة.

مجموعة دراسة الشيخوخة الصحية. لمقارنة أطوال التيلومير لموضوعات مرض الانسداد الرئوي المزمن في LHS بمجموعة تحكم بدون مرض الانسداد الرئوي المزمن ، استخدمنا بيانات التيلومير من الأشخاص في منتصف العمر من دراسة الشيخوخة الصحية ، الذين تتراوح أعمارهم بين 40 و 50 عامًا وتم تجنيدهم عشوائيًا بغض النظر عن الصحة أو حالة المرض (مثل عناصر تحكم & # x0201cnegative & # x0201d) [17].

Advair ، المؤشرات الحيوية في مجموعة COPD (ABC). كمجموعة تحكم ثانية (أي & # x0201cpositive & # x0201d الضوابط) ، قمنا بقياس طول التيلومير من الكريات البيض المحيطية التي تم الحصول عليها من المرضى الذين يعانون من مرض الانسداد الرئوي المزمن المعتدل إلى الشديد ، كما هو محدد قياس التنفس بواسطة FEV1/ نسبة FVC أقل من 70 & # x00025 و FEV1 أقل من 80 & # x00025 من المتوقع ، والذين لديهم ما لا يقل عن 10 سنوات من التدخين وكان عمره 40 عامًا على الأقل [18]. وقد سبق نشر نتائج هذه الدراسة [13].

استخراج الحمض النووي الكريات البيض

تم تحديد تركيز الحمض النووي من الدم المحيطي الذي تم جمعه في السنة الخامسة باستخدام مقياس الطيف الضوئي NanoDrop 8000 (Thermo Scientific ، Wilmington ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم تخفيف عينات الحمض النووي إلى 1 نانوغرام / & # x000b5 لتر في المخزن المؤقت 1 & ​​# x000d7 Tris-EDTA وتخزينها في & # x0221220 & # x000b0C للاستخدام اللاحق في تفاعل سلسلة البوليميراز الكمي (qPCR).

قياس طول التيلومير

تم قياس تيلوميرات كريات الدم البيضاء في الدم المحيطي باستخدام بروتوكول qPCR المعدل الذي وصفه كاوثون [19]. تسلسل التمهيدي (مكتوب 5 & # x02032 & # x021923 & # x02032) كانت: الهاتف 1 ، GGTTTTTGAG -GGTGAGGGTGAGGTGAGGGTGAGGGT الهاتف 2 تككجاكتاتككتاتككتاتكك-تاتككتاتككتا 36B4u ، كاجكاجتججاجتجتاتك 36B4d ، CCCATTCTA -TCATCAACGGTACAA. كان الجين المرجعي للنسخة المفردة المستخدم هو 36B4 والتركيزات النهائية للبادئات (Sigma ، The Woodlands ، TX) كانت tel 1 ، 270 نانومتر ، 900 نانومتر ، 36B4u ، 300 نانومتر 36B4d ، 500 نانومتر.

تم إجراء قياس طول التيلومير في ثلاث نسخ لجميع العينات في 384 لوحة تفاعل بصري واضح جيدًا (النظم البيولوجية التطبيقية ، فوستر سيتي ، كاليفورنيا). تم تقييم الحمض النووي المرجعي الذي تم الحصول عليه من معهد كورييل (كامدن ، نيوجيرسي) في ثلاث نسخ على كل لوحة PCR لحساب اختلاف القياس البيني. يحتوي كل بئر على 10 & # x000b5L QuantiTect SYBR Green PCR Master Mix (QIAGEN ، Mississauga ، ON) وتركيز DNA نهائي يبلغ 0.25 نانوغرام / & # x000b5L. بعد التحميل ، تم إغلاق الألواح بغشاء لاصق بصري MicroAmp (النظم البيولوجية التطبيقية ، فوستر سيتي ، كاليفورنيا) وطردها لفترة وجيزة عند 2500 دورة في الدقيقة. تم إجراء التفاعلات في نظام اكتشاف التسلسل ABI PRISM 7900HT (Applied Biosystems ، Foster City CA). بدأ ملف تعريف التدوير الحراري لكل من التيلومير وتضخيم الجينات أحادية النسخة بـ 50 & # x000b0C لمدة دقيقتين ثم 95 & # x000b0C لمدة دقيقتين. بالنسبة لـ telomere PCR ، هناك 30 دورة 95 & # x000b0C لمدة 15 ثانية و 54 & # x000b0C لمدة دقيقتين. تمت متابعة ملف تعريف الدراجات 36B4 بـ 35 دورة من 95 & # x000b0C لمدة 15 ثانية و 58 & # x000b0C لمدة دقيقة واحدة. تم قياس طول التيلومير كنسبة T / S نسبي (T & # x0200a = & # x0200atelomere، S & # x0200a = & # x0200 جين نسخة واحدة) ، محسوبة وفقًا لصيغة Cawthon [19].

تحليل احصائي

تم توحيد أطوال التيلومير لخلايا الدم البيضاء في الدم المحيطي لجين نسخة واحدة مرجعية (T / S). لأغراض التحليل ، تم تقسيم المشاركين إلى أرباع بناءً على نسبة T / S الخاصة بهم. تمت مقارنة الخصائص السريرية بعد ذلك باستخدام اختبار مربع كاي للمتغيرات ثنائية التفرع (باستخدام درجات الحرية المناسبة) واختبار كوكران أرميتاج لاتجاه المتغيرات المستمرة. كانت نقطة النهاية الأولية لهذه الدراسة هي الوفيات الناجمة عن جميع الأسباب. قمنا بمقارنة مخاطر الوفيات لجميع الأسباب عبر الشرائح الربعية خلال فترة المتابعة باستخدام طريقة كابلان ماير (K-M) للتحليل أحادي المتغير ونموذج المخاطر النسبية لكوكس للتحليل متعدد المتغيرات. تمت مقارنة منحنيات البقاء على قيد الحياة من نوع K عبر الشرائح الربعية T / S باستخدام اختبار تسجيل الترتيب. في النموذج متعدد المتغيرات ، قمنا بتضمين المتغيرات المشتركة التالية: العمر ، والجنس ، ومؤشر كتلة الجسم (BMI) ، وحالة التدخين خلال السنوات الخمس الأولى من المتابعة ، وسنوات التدخين ، وضغط الدم في السنة 5 ، و FEV1 في العام 5. FEV1ومؤشر كتلة الجسم وقياسات ضغط الدم وسنوات التدخين لم تؤثر بشكل كبير على نتائج النموذج. وبالتالي ، تم إسقاطهم في التحليل النهائي. تم استخدام نهج مماثل لنقاط نهاية الوفيات الخاصة بالسبب. تمت مقارنة نسب T / S عبر مجموعات التدخين باستخدام اختبار Kruskal-Wallis ، حيث كانت البيانات غير موزعة بشكل طبيعي. الارتباطات بين نسبة T / S والمتغيرات مثل FEV1 في السنة الخامسة والعمر تم اختبارها باستخدام اختبار سبيرمان للمتغيرات غير المعلمية. اعتبرت قيم P أقل من 0.05 (باستخدام اختبار ثنائي الذيل) مهمة. أجريت جميع التحليلات باستخدام SAS (الإصدار 9.1 ، كاري ، إن سي). تمت الموافقة على استخدام عينات دراسة LHS و ABC من قبل مجلس أخلاقيات البحث في Providence Health Care / UBC. تمت الموافقة على استخدام عينات من دراسة الشيخوخة الصحية من قبل مجلس أخلاقيات البحث السريري المشترك في جامعة كولومبيا البريطانية ووكالة كولومبيا البريطانية للسرطان.


نتائج

يتم عرض الإحصاء الوصفي وفروق المجموعة عبر متغيرات الدراسة في الجدول 1. يتم عرض الارتباطات ثنائية المتغير في الجدول 2. كما هو مبين في هذه الجداول ، كانت هناك اختلافات جماعية في الوزن عند الولادة ومعدل الذكاء. أيضا ، الوزن عند الولادة ، معدل الذكاء ، والجنس ارتبطت بشكل متباين بعلم النفس المرضي. وبالتالي ، أعدنا تشغيل نماذج مسار منفصلة مع كل من الجنس ، ونسبة الذكاء ، والوزن عند الولادة كمتغيرات مشتركة ولم تختلف النتائج جوهريًا. كما هو موضح في الجدول 1 ، لم تكن هناك ارتباطات مباشرة بين طول التيلومير في أي نقطة زمنية وحالة المجموعة & # x02013 إما مقارنة NIG بـ EIG ، أو FCG إلى CAUG. كما هو موضح في الجدول 2 ، كان هناك استقرار في ترتيب الترتيب في TL بمرور الوقت ، مما يعني أن الأفراد الذين لديهم تيلوميرات أقصر في عمر 8 & # x0201310 يميلون إلى امتلاك تيلوميرات أقصر في عمر 12 & # x0201314 مقارنةً بأولئك الذين لديهم تيلوميرات أطول. علاوة على ذلك ، تمشيا مع الدراسات السابقة ، كان هناك تقصير في التيلومير بمرور الوقت عبر العينة بأكملها ، ر (مدافع = 76) = 3.01 ، ص = .004.

الجدول 1:

الخصائص والإحصاءات الوصفية بين الأطفال المؤسسين وغير المودعين في مؤسسات

تدابير العمر 8 & # x0201310
جميع المشاركينالأطفال في المؤسسات فقط
EIG (ن= 96)NIG (ن= 99)ر أو & # x003c7 2 CAUG (ن= 44)FCG (ن= 52)ر أو & # x003c7 2
الجنس (٪ ذكور)52.1%48.5%.2552.351.9.001
الوزن عند الولادة (ز)2755.23208.05.06 *** 2847.52675.01.33
معدل ذكاء كامل80.2100.29.30 *** 78.281.91.29
العامل العام.45& # x02212.446.84 *** .51.40.57
عامل الاستيعاب.04& # x02212.04.63.12& # x02212.02.69
عامل التبعية.00.00.06.06& # x02212.04.44
طول التيلومير1.601.59.061.531.65.74
تدابير العمر 12 & # x0201314
جميع المشاركينالأطفال في المؤسسات فقط
EIG (ن= 112)NIG (ن= 50)ر أو & # x003c7 2 CAUG (ن= 56)FCG (ن= 56)ر أو & # x003c7 2
الجنس (٪ ذكور)51.846.0.4651.851.8& # x0003c.001
الوزن عند الولادة (ز)2799.53244.94.29 *** 2878.62722.01.31
معدل ذكاء كامل72.398.19.00 *** 68.675.82.19 *
العامل العام.20& # x02212.444.29 *** .34.061.52
عامل الاستيعاب& # x02212.05.111.22& # x02212.01& # x02212.09.58
عامل التبعية.16& # x02212.374.44 *** .23.10.63
طول التيلومير1.401.43.641.381.41.59

ملاحظة: جميع الإحصائيات تعني ما عدا الجنس (٪). المتغيرات العامة والداخلية والخارجية هي درجات عوامل بمتوسط ​​عينة إجمالي يبلغ صفر.

تم تقييم معدل الذكاء باستخدام WISC-IV. يقاس وزن الولادة بالجرام. درجات طول التيلومير غير معدلة في هذا الجدول.

الجدول 2:

الارتباطات ثنائية المتغير بين متغيرات الدراسة وخصائص الطفل الأخرى

1.2.3.4.5.6.7.8.9.10.11.
1. العامل العام (العمر 8 & # x0201310)& # x02013
2. عامل التضمين (العمر 8 & # x0201310).00& # x02013
3. عامل التبعية (العمر 8 & # x0201310).00.02& # x02013
4. طول التيلومير (العمر 8 & # x0201310)& # x02212.02& # x02212.19 & # x000a7 .03& # x02013
5. العامل العام (العمر 12 & # x0201314).29 ** .00& # x02212.09.18& # x02013
6. عامل التضمين (العمر 12 & # x0201314)& # x02212.23 ** .12.04.03.15 & # x000a7 & # x02013
7. عامل التبعية (العمر 12 & # x0201314).37 *** & # x02212.04.06& # x02212.02.04& # x02212.25 ** & # x02013
8. طول التيلومير (العمر 12 & # x0201314)& # x02212.05& # x02212.25 ** .08.35 ** & # x02212.22 ** & # x02212.05& # x02212.01& # x02013
9. الجنس (ذكور).15 * & # x02212.07& # x02212.05.01.16 * .01.24 ** & # x02212.01& # x02013
10. الوزن عند الولادة& # x02212.23 ** & # x02212.09.23 ** .01& # x02212.22 ** & # x02212.13& # x02212.11& # x02212.16 & # x000a7 .09& # x02013
11. FSIQ (العمر 8 & # x0201310)& # x02212.54 *** & # x02212.10.05.04& # x02013& # x02013& # x02013& # x02013& # x02212.08.34 *** & # x02013
12. FSIQ (العمر 12 & # x0201314)& # x02013& # x02013& # x02013& # x02013& # x02212.31 *** .12& # x02212.32 *** .02& # x02212.08.29 ** .90 ***

بالنظر إلى النتائج السابقة للعلاقات الخاصة بالجنس بين مدة الرعاية المؤسسية وطول التيلومير ، فإننا نقدم الارتباطات بين طول الوقت الذي يقضيه في المؤسسات بين EIG (النسبة المئوية من عمر واحد & # x02019 حتى عمر معين) وطول التيلومير للذكور والإناث المشاركين في الجدول S1 ، متاح عبر الإنترنت. ارتبطت مدة الرعاية المؤسسية الأكبر بمقدار 54 شهرًا و 8 سنوات بطول التيلومير الأقصر في عمر 8 & # x0201310 في المشاركين الذكور. في المشاركات الإناث ، ارتبطت مدة أطول للرعاية المؤسسية عند خط الأساس و 54 شهرًا بطول التيلومير الأقصر في عمر 12 & # x0201314. تم ربط مقدار الوقت الذي يقضيه في المؤسسات بمرور الوقت (الجدول S2 ، متاح عبر الإنترنت). عندما تم فحص مدة الرعاية المؤسسية وطول التيلومير داخل FCG و CAUG (المحاسبة للجنس) ، ارتبط التعرض الأكبر للرعاية المؤسسية عند 54 شهرًا و 8 سنوات و 12 عامًا بطول التيلومير الأقصر في عمر 12 & # x0201314 بين CAUG ، ولكن ليس FCG (الجدول S3 ، متاح عبر الإنترنت). لم يتم فحص الفروق بين الجنسين داخل مجموعات FCG و CAUG بسبب قيود الطاقة. نتوسع في هذه النتائج في الملحق 1. وبالتالي ، هناك ارتباطات بين مدة المؤسسة وطول التيلومير التي تختلف بناءً على الجنس وعمر التقييم بدلاً من الارتباطات المباشرة بين مجموعة المؤسسات وطول التيلومير. العلاقة القوية بين الوضع المؤسسي (NIG = 0 EIG = 1) وعلم النفس المرضي يبرر إدراجه كمتغير مشترك في النموذج الأساسي ، الموضح أدناه.

الارتباط بين طول التيلومير وعلم النفس المرضي

يعرض الشكل 1 نموذج المسار الطولي الذي يصف العلاقة بين طول التيلومير والعوامل العامة والداخلية والتخارجية. ملائمة النموذج كانت مقبولة: RMSEA = .069 [.02 ، .11] ، PCLOSE = .22 ، CFI = .90 ، و SRMR = .05. كان لدى أطفال EIG أمراض نفسية عامة أعلى بكثير في سن 8 & # x0201310 من NIG ، ومع ذلك لم تكن حالة الإقامة في المؤسسات مرتبطة بالاستيعاب أو الاستيعاب الخارجي في سن 8 & # x0201310 بعد حساب العامل العام. علاوة على ذلك ، كان هناك استقرار نسبي في علم النفس المرضي العام بمرور الوقت ، بغض النظر عن الوضع المؤسسي ، ولكن كان هناك استقرار ضئيل في الاستيعاب أو الاستيعاب الخارجي بعد مراعاة الاستقرار في العامل العام.

ملحوظة. المعلمات موحدة & # x003b2 المعاملات. عوامل علم النفس المرضي هي درجات العوامل المحفوظة من نموذج العامل الثنائي الكامن وتستخدم كمتغيرات واضحة. يتم عرض العلاقات بين طول التيلومير وعلم النفس المرضي فقط. انظر الجدول 1 للجمعيات بين درجات عامل علم النفس المرضي. EIG = مجموعة مؤسسية دائمًا NIG = غير مؤسسية أبدًا.

من ناحية في الوقت المناسب ارتباطات ، ارتبط طول التيلومير الأقصر في سن 8 & # x0201310 بشكل كبير بمشاكل داخلية أعلى ، لكنه لم يكن مرتبطًا بعلم النفس المرضي العام أو الخارجي. من ناحية أخرى ، ارتبط طول التيلومير الأقصر في سن 12 & # x0201314 بعلم النفس المرضي العام ، ولكن ليس الاستيعاب أو الاستيعاب الخارجي. أخيرا، عبر الزمان كشفت التأثيرات (أي الارتباطات المتخلفة) أن ارتفاع علم النفس المرضي الداخلي في سن 8 & # x0201310 توقع طول التيلومير الأقصر في عمر 12 & # x0201314 بعد التحكم في طول التيلومير في عمر 8 & # x0201310. يمكن تفسير هذا التأثير على أنه ارتفاع علم النفس المرضي الداخلي الذي يتنبأ بالتغير في طول التيلومير من عمر 8 & # x0201310 إلى عمر 12 & # x0201314. لم يرتبط علم النفس المرضي العام أو الخارجي في سن 8 & # x0201310 بطول التيلومير في عمر 12 & # x0201314 ، ولم تظهر أي آثار متبادلة لطول التيلومير على علم النفس المرضي. تم اختبار جميع التأثيرات في وقت واحد وشرطية لجميع التأثيرات الأخرى في النموذج. نظرًا لأن هذه لم تكن اختبارات مستقلة ، فلم يكن هناك حاجة إلى تصحيح للاختبارات المتعددة.

أخيرًا ، تمشيا مع القصد الأصلي من RCT ، قمنا بفحص ما إذا كانت الارتباطات بين عوامل علم النفس المرضي وطول التيلومير تختلف بين: (1) EIG و NIG ، و (2) CAUG و FCG. قدم النموذج الأخير ملاءمة ضعيفة للبيانات ، ويرجع ذلك على الأرجح إلى عدم كفاية الطاقة نظرًا لحجم العينة الصغير لمجموعات CAUG و FCG. يتم توفير نتائج النموذج السابق في الملحق 1 ، المتاح عبر الإنترنت. نظرًا لعدم وجود اختلافات ملحوظة في المسارات التي تربط علم النفس المرضي وطول التيلومير بين أطفال EIG و NIG ، فقد انهار النموذج الأساسي أعلاه في جميع الأطفال.


شكر وتقدير

هذه المراجعة هي نتيجة المناقشات والتعاون المنبثق عن ورشة عمل حول ديناميات التيلومير في الكائنات غير النموذجية. تم دعم ورشة العمل من خلال منحة BBSRC الدولية لورشة العمل ودعم إضافي من جمعية علم الوراثة و Agilent Technologies ، ومن جائزة الباحث المتقدم من مجلس البحوث الأوروبي إلى PM. نحن ممتنون لجميع الحاضرين في ورشة العمل لمساهمتهم في مناقشاتنا لطرق قياس التيلومير ، ولأبراهام أفيف وهانا فروي وفرانسوا كريسكولو لتعليقاتهم على مسودات المخطوطات. يتم دعم DHN من قبل زمالة ديفيد فيليبس من BBSRC.

اسم الملف وصف
mee312161-sup-0001-TableS1.docxWord مستند ، 16.1 كيلوبايت الجدول S1. قائمة الأنواع وطرق تخزين الأنسجة واستخراج الحمض النووي ومدى ملاءمتها لتحليل طول التيلومير اللاحق ، بناءً على الخبرة السابقة للمؤلفين والاتصالات الشخصية مع الزملاء. تشير AE و TE إلى المحاليل العازلة شائعة الاستخدام: AE عبارة عن مزيج من أسيتات الصوديوم و EDTA و TE من محلول Tris و EDTA.

يرجى ملاحظة ما يلي: الناشر غير مسؤول عن محتوى أو وظيفة أي معلومات داعمة مقدمة من المؤلفين. يجب توجيه أي استفسارات (بخلاف المحتوى المفقود) إلى المؤلف المقابل للمقالة.


المواد التكميلية الإلكترونية متاحة على الإنترنت على https://doi.org/10.6084/m9.figshare.c.5001038.

تم النشر بواسطة الجمعية الملكية بموجب شروط رخصة المشاع الإبداعي http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/ ، والتي تسمح بالاستخدام غير المقيد ، بشرط ذكر المؤلف والمصدر الأصليين.

مراجع

. 2006 هل تربط ديناميات التيلومير بين نمط الحياة والعمر؟ اتجاهات Ecol. Evol. 21، 47-53. (دوى: 10.1016 / j.tree.2005.11.007) كروسريف ، PubMed ، ISI ، الباحث العلمي من Google

. 2010 التيلوميرات وتاريخ الحياة: طويل وقصير. آن. نيويورك أكاد. علوم. 1206، 130-142. (دوى: 10.1111 / j.1749-6632.2010.05705.x) كروسريف ، PubMed ، ISI ، الباحث العلمي من Google

إم هوسمان ، ماركيتو نيو مكسيكو

. 2010 التيلوميرات: ربط الإجهاد والبقاء والبيئة والتطور. Cur. زول. 56، 714-727. (دوى: 10.1093 / czoolo / 56.6.714) كروسريف ، آي إس آي ، الباحث العلمي من Google

أولسون م ، وابسترا إي ، فريزين سف

. 2018 البيئة التطورية للتيلوميرات: مراجعة. آن. نيويورك أكاد. علوم. 1422، 5-28. (دوى: 10.1111 / nyas.13443) كروسريف ، PubMed ، ISI ، الباحث العلمي من Google

أولسون م ، وابسترا إي ، فريزين كر

. 2018 التيلوميرات الخارجية الحرارية: حان الوقت للخروج من البرد. فيل. عبر. R. Soc. ب 373، 20160449. (doi: 10.1098 / rstb.2016.0449) Link، ISI، Google Scholar

جوميز إن ، شاي جي دبليو ، رايت وي

. 2010 بيولوجيا التيلومير في ميتازوا. FEBS ليت. 584، 3741-3751. (دوى: 10.1016 / j.febslet.2010.07.031) كروسريف ، PubMed ، ISI ، الباحث العلمي من Google

. 2015 إصلاح استئصال الحمض النووي في التيلوميرات. إصلاح الحمض النووي 36، 137-145. (دوى: 10.1016 / j.dnarep.2015.09.017) كروسريف ، PubMed ، ISI ، الباحث العلمي من Google

. 2018 تلف الحمض النووي وإصلاحه وصيانته لطول التيلومير: دور المكملات الغذائية. في الطفرات: المقايسات والتطبيقات (محرران

كومار أ ، دوبروفولسكي في إن ، داوان أ ، شانكر ر

) ، ص 287-307. أمستردام ، هولندا: إلسفير. منحة جوجل

2017 انتشار السرطان ومسبباته في الحيوانات البرية والأسيرة. في علم البيئة وتطور السرطان (محرران

أوجفاري ب ، روش ب ، توماس ف

) ، الصفحات 11-46. لندن ، المملكة المتحدة: مطبعة أكاديمية. كروسريف ، الباحث العلمي من Google

. 2009 التيلوميرات والمرض. EMBO J. 28، 2532-2540. (دوى: 10.1038 / emboj.2009.172) كروسريف ، PubMed ، ISI ، الباحث العلمي من Google

. 2012 متلازمات التيلومير. نات. القس جينيه. 13، 693-704. (دوى: 10.1038 / nrg3436) كروسريف ، PubMed ، ISI ، الباحث العلمي من Google

Stone RC ، Horvath K ، Kark JD ، Susser E ، Tishkoff SA ، Aviv A

. 2016 طول التيلومير والمقايضة بين السرطان وتصلب الشرايين. بلوس جينيت. 12، e1006144. (دوى: 10.1371 / journal.pgen.1006144) كروسريف ، PubMed ، ISI ، الباحث العلمي من Google

باريت إلب ، ريتشاردسون دي إس

. 2011 الاختلافات الجنسية في التيلوميرات والعمر. شيخوخة الخلية 10، 913-921. (دوى: 10.1111 / j.1474-9726.2011.00741.x) كروسريف ، PubMed ، ISI ، الباحث العلمي من Google

2014 الجنس وطول التيلومير: مراجعة منهجية وتحليل تلوي. إكسب. جيرونتول. 51، 15-27. (دوى: 10.1016 / j.exger.2013.12.004) كروسريف ، PubMed ، ISI ، الباحث العلمي من Google

رولينغز إن ، فريزين كر ، سودكا ج ، ويتينغتون سي ، جيرودو إم ، ويلسون إم ، أولسون إم

. 2017 ديناميكيات التيلومير في سحلية مع الاستثمار الإنجابي الخاص بالصورة الذاتية والصيانة الذاتية. ايكول. Evol. 7، 5163-5169. (دوى: 10.1002 / ece3.2712) كروسريف ، PubMed ، ISI ، الباحث العلمي من Google

أصغر M ، Palinauskas V ، Zaghdoudi-Allan N ، Valkiunas G ، Mukhin A ، Platonova E ، Farnert A ، Bensch S ، Hasselquist D

. 2016 تقصير التيلومير الموازي في أنسجة الجسم المتعددة بسبب عدوى الملاريا. بروك. R. Soc. لوند. بيول. علوم. 283، 20161184. (doi: 10.1098 / rspb.2016.1184) Link، ISI، Google Scholar

رولينغز إن ، فريزين سي آر ، ويتينغتون سم ، جوهانسون آر ، شاين آر ، أولسون إم

. 2019 الاختلافات الخاصة بالجنس والأنسجة في طول التيلومير في الزواحف. ايكول. Evol. 9، 6211-6219. (دوى: 10.1002 / ece3.5164) PubMed و ISI و Google Scholar

Benetos A، Kimura M، Labat C، Buchoff GM، Huber S، Labat L، Lu XB، Aviv A

. 2011 نموذج لديناميكيات التيلومير في كريات الدم البيضاء. شيخوخة الخلية 10، 991-995. (دوى: 10.1111 / j.1474-9726.2011.00744.x) كروسريف ، PubMed ، ISI ، الباحث العلمي من Google

Daniali L، Benetos A، Susser E، Kark JD، Labat C، Kimura M، Desai K، Granick M، Aviv A

. 2013 تقصر التيلوميرات بمعدلات معادلة في الأنسجة الجسدية للبالغين. نات. كومون. 4، 1597. (doi: 10.1038 / ncomms2602) Crossref، PubMed، ISI، Google Scholar

Reichert S، Criscuolo F، Verinaud E، Zahn S، Massemin S

. 2013 ارتباطات طول التيلومير بين الأنسجة الجسدية في عصافير الحمار الوحشي البالغة. بلوس واحد 8، e81496. (دوى: 10.1371 / journal.pone.0081496) كروسريف ، PubMed ، ISI ، الباحث العلمي من Google

. 2004 أمراض الدم في الفقاريات السفلية. في الاجتماع السنوي الخامس والخمسين للكلية الأمريكية لأخصائيي الأمراض البيطرية (ACVP) والاجتماع السنوي التاسع والثلاثين للجمعية الأمريكية لعلم الأمراض السريرية (ASVCP). ميدلتون ، ويسكونسن: الكلية الأمريكية لأخصائيي علم الأمراض البيطري والجمعية الأمريكية لعلم الأمراض البيطري السريري. منحة جوجل

بوليو إم ، بينوا إل ، أباجا إس ، كابيلر بي إم ، شاربانتير إم جي إي

. 2017 اهتم بالخلية: التغيرات الموسمية في مرايا طول التيلومير في ملف الكريات البيض. مول. ايكول. 26، 5603-5613. (دوى: 10/1111 / ميك 14329) كروسريف ، PubMed ، ISI ، الباحث العلمي من Google

. 2009 التشكل المقارن ، التطور والوظيفة لخلايا الدم في الفقاريات غير الثديية. J. إكسوت. حيوان أليف. ميد. 18، 87-97. كروسريف ، آي إس آي ، الباحث العلمي من جوجل

. 2019 فسيولوجيا خلايا الدم الحمراء والبيضاء. أنايسث. مركز العناية المركزة. 20، 170-174. (دوى: 10.1016 / j.mpaic.2019.01.001) كروسريف ، آي إس آي ، الباحث العلمي من Google

. 2002 الإجهاد التأكسدي يقصر التيلوميرات. اتجاهات Biochem. علوم. 27، 339-344. (دوى: 10.1016 / S0968-0004 (02) 02110-2) كروسريف ، PubMed ، ISI ، الباحث العلمي من Google

Baerlocher GM ، Lansdorp PM

. 2003 قياسات طول التيلومير في مجموعات فرعية من الكريات البيض بواسطة Flow-FISH الآلي متعدد الألوان. القياس الخلوي الجزء أ 55 أ، 1-6. (دوى: 10.1002 / cyto.a.10064) كروسريف ، آي إس آي ، الباحث العلمي من Google

كارفالهو دي إم بي ، كويروز-هازارباسانوف إن جي ، ماسوكو كو ، روسي إس ، سانتانا إس إس ، كاتاو دياس جي إل ، جريغو كيه إف

. 2016 توصيف قياس التدفق الخلوي لمجموعات كريات الدم البيضاء في الدم المحيطي لثلاثة أنواع من الثعابين الاستوائية الجديدة: بوا العاصرة ، بوثروبس جاراكا، و Crotalus durissus . دكتور بيطري. كلين. باتول. 45، 271-280. (دوى: 10.1111 / vcp.12358) كروسريف ، PubMed ، ISI ، الباحث العلمي من Google

Carvalho de MPN، Queiroz-Hazarbassanov NGT، de Oliveira Massoco C، Sant'Anna SS، Lourenço MM، Levin G، Sogayar MC، Grego KF، Catão-Dias JL

. 2017 التوصيف الوظيفي لمجموعات الكريات البيض في الدم المحيطي للثعابين الاستوائية الجديدة: ربط ميزات خلية قياس التدفق ، وصور الفحص المجهري ومستويات الكورتيكوستيرون في الدم. ديف. شركات إمونول. 74، 144-153. (دوى: 10.1016 / j.dci.2017.04.007) كروسريف ، PubMed ، ISI ، الباحث العلمي من Google

أولسون إم ، فريزين سي آر ، رولينجز إن ، سودكا جي ، ليندسي دبليو ، ويتينجتون سي ، ويلسون إم آر

. 2018 الآثار طويلة المدى لإصلاح الفائق والحمض النووي على تيلوميرات السحلية. مول. ايكول. 27، 5154-5164. (دوى: 10.1111 / mec.14913) كروسريف ، PubMed ، ISI ، الباحث العلمي من Google

رولينغز إن ، فريزين كر ، سودكا ج ، ويتينغتون سي ، ويلسون إم ، أولسون م

. 2017 ديناميكيات التيلومير في سحلية مع الاستثمار الإنجابي الخاص بالصورة الذاتية والصيانة الذاتية. ايكول. Evol. 7، 5163-5169. (دوى: 10.1002 / ece3.2712) كروسريف ، PubMed ، ISI ، الباحث العلمي من Google

أولسون إم ، هيلي إم ، وابسترا إي ، شوارتز تي ، ليباس إن ، أولر تي

. 2007 تباين نظام التزاوج وتقلبات الشكل في سحلية متعددة الأشكال. مول. ايكول. 16، 5307-5315. (دوى: 10.1111 / j.1365-294X.2007.03578.x) كروسريف ، PubMed ، ISI ، الباحث العلمي من Google

أولسون م ، هيلي م ، وابسترا إي ، أولر تي

. 2009 اختبار جودة الناقل: تجربة ميدانية على إشارات السحالي. تطور 63، 695-701. (دوى: 10.1111 / j.1558-5646.2008.00569.x) كروسريف ، PubMed ، ISI ، الباحث العلمي من Google

. 2009 كبير جدًا بالنسبة لأحذيته: هل التكاليف الاجتماعية تحافظ على الحالة المعتمدة على الحالة تشير إلى الصدق في سحلية أسترالية؟ أوسترال إيكول. 34، 636-640. (دوى: 10.1111 / j.1442-9993.2009.01968.x) كروسريف ، آي إس آي ، الباحث العلمي من Google

. 2000 Chapter 21: Reptilian complete blood count . في Laboratory medicine: avian and exotic pets (ed.

), pp. 193-197. Philadelphia, PA : W.B. Saunders Company . منحة جوجل

Stacy NI, Alleman AR, Sayler KA

. 2011 Diagnostic hematology of reptiles . كلين. مختبر. ميد. 31, 87-108. (doi:10.1016/j.cll.2010.10.006) Crossref, PubMed, ISI, Google Scholar

. 2008 Hematologic evaluation is mainstay of diagnosis for reptiles . دكتور بيطري. تقنية. 29, 616. Google Scholar

Nazarpour R, Zabihi E, Alijanpour E, Abedian Z, Mehdizadeh H, Rahimi F

. 2012 Optimization of human peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) cryopreservation . كثافة العمليات جيه مول. زنزانة. ميد. 1, 88-93. PubMed ، الباحث العلمي من Google

. 1991 Structure and function of telomeres . طبيعة سجية 350, 569-573. (doi: 10.1038/350569a0) Crossref, PubMed, ISI, Google Scholar

Fischer U, Ototake M, Nakanishi T

. 1998 Lifespan of circulating blood cells in ginbuna crucian carp (Carassius auratus langsdorfii) . Fish Shellfish Immunol. 8, 339-349. (doi:10.1006/fsim.1998.0144) Crossref, ISI, Google Scholar

Asghar M, Hasselquist D, Hansson B, Zehtindjiev P, Westerdahl H, Bensch S

. 2015 Hidden costs of infection: chronic malaria accelerates telomere degradation and senescence in wild birds . علم 347, 436-438. (doi10.1126/science.1261121) Crossref, PubMed, ISI, Google Scholar

Angelier F, Costantini D, Blévin P, Chastel O

. 2018 Do glucocorticoids mediate the link between environmental conditions and telomere dynamics in wild vertebrates? مراجعة . الجنرال شركات. إندوكرينول. 256, 99-111. (doi:10.1016/j.ygcen.2017.07.007) Crossref, PubMed, ISI, Google Scholar

Kurz DJ, Decary S, Hong Y, Trivier E, Akhmedov A, Erusalimsky JD

. 2004 Chronic oxidative stress compromises telomere integrity and accelerates the onset of senescence in human endothelial cells . J. Cell Sci. 117, 2417-2426. (doi:10.1242/jcs.01097) Crossref, PubMed, ISI, Google Scholar

Fouquerel E, Parikh D, Opresko P

. 2016 DNA damage processing at telomeres: the ends justify the means . إصلاح الحمض النووي 44, 159-168. (doi:10.1016/j.dnarep.2016.05.022) Crossref, PubMed, ISI, Google Scholar

Sardina JL, Lopez-Ruano G, Sanchez-Sanchez B, Llanillo M, Hernandez-Hernandez A


Design and methods

Setting and subjects

This analysis was performed within the framework of the Prevention of Renal and Vascular End-Stage Disease (PREVEND, www.prevend.org) study. The PREVEND study is an ongoing, longitudinal, general, population-based cohort study of individuals aged 28–75 years living in the city of Groningen, the Netherlands. For the present study, we included subjects who donated a full blood sample for DNA extraction at baseline (T1) and/or during the first (T2) and/or the second (T3) follow-up visit. Details of the study have been described previously 15 . In brief, 8592 subjects completed the baseline survey (1997–1998) and were invited to visit the outpatient department after approximately 4.3 years for the first and approximately 6.6 years for the second follow-up visit. At each visit, demographic and anthropometric characteristics and serum biomarkers were assessed. The PREVEND study has been approved by the local medical ethics committee and is being conducted in accordance with the guidelines of the Declaration of Helsinki. All participants provided written informed consent before enrolment.

Measurement of telomere length

Details of the methods of DNA extraction and of telomere length measurements are provided in the Appendix S1. In brief, all samples for DNA collected at different time-points were mixed and randomly extracted using a standard DNA extraction kit (QIamp, Qiagen, Venlo, the Netherlands) to neutralize potential batch effects. Mean relative leukocyte telomere length was measured using a monochrome multiplex real-time quantitative polymerase chain reaction technique (developed by R.M.C.) 16 . This technique enables the telomere-specific amplification and the single copy gene (reference) amplification to be carried out in a single reaction well with quantification measurements at different temperatures 16 . The ratio of telomere (T) to single copy gene (S) content (T/S ratio) is a relative measure of telomere length (RTL) and is expressed in arbitrary units (RTLU). All samples were measured in triplicate, and the average of the three runs was used to provide the mean RTLU for each individual. The intra-assay coefficients of variation were 2.0%, 1.9% and 4.5% for T, S and the T/S ratio, respectively.

We adhered to the arbitrary categorization of telomere trajectories as previously reported: shortening was defined as a >10% decrease in RTL, stable as a ≤10% change in RTL and elongation as a >10% increase in RTL at T3 compared to baseline 17, 18 .

Other measurements and definitions

All participants completed a questionnaire regarding demographic profile and smoking habits. Smoking was categorized as current smoking, previous smoking and nonsmoking. Body mass index (BMI) was calculated as weight (kg) divided by height squared (m 2 ) and categorized as follows: normal, <25 kg m −2 overweight, 25–30 kg m −2 and obese, ≥30 kg m −2 . Hypertension was defined as systolic blood pressure ≥140 mmHg, diastolic blood pressure ≥90 mmHg or the use of antihypertensive medication prehypertension was defined as systolic blood pressure <140 and ≥120 mmHg and diastolic blood pressure <90 and ≥80 mmHg and normotension was defined as both systolic blood pressure <120 mmHg and diastolic blood pressure <80 mmHg. Diabetes was defined as a fasting plasma glucose level of ≥126 mg dL −1 (7.0 mmol L −1 ), a nonfasting plasma glucose level of ≥200 mg dL −1 (11.1 mmol L −1 ) or the use of oral antidiabetic agents. Hypercholesterolaemia was defined as a total cholesterol level of ≥250 mg dL −1 (6.5 mmol L −1 ) or the use of lipid-lowering medication ≤200 mg dL −1 (5.13 mmol L −1 ) was considered an optimal cholesterol concentration. Estimated glomerular filtration rate (eGFR) was calculated using the Modification of Diet in Renal Disease (MDRD) study equation taking into account sex, age, ethnicity and serum creatinine levels 19 . Details of the measurement methods can be found in the Appendix S1.

تحليل احصائي

To obtain a normal distribution, telomere length was natural-log-transformed. Other continuous variables with a skewed distribution (creatinine, insulin, glucose, high-sensitivity C-reactive protein, cholesterol, HDL and triglycerides) were also natural-log-transformed prior to analysis. Individuals in the bottom and top 0.5% of the RTL distribution were excluded to limit the undue influence of outliers in the regression analysis. Differences in telomere lengths between groups were tested using Student's ر-test or one-way anova . Cross-sectional associations between variables and telomere length were evaluated using standard linear regression models. Multivariate linear regression models were used to adjust for age and gender. To investigate telomere dynamics across time, two-level hierarchical growth models were constructed. Variables were centred around the grand mean (i.e. the mean was set to zero). Details of the model-building strategy, centring and multitest correction are provided in the Appendix S1.


الاستنتاجات

Numerous observational studies of TL have been conducted among breast cancer patients in the last 20 years. Despite the major methodologic differences between studies, when considering all the studies (peripheral blood and tumor tissue) and all outcomes together, there was a trend toward an association of longer telomeres with a better prognosis. Further longitudinal studies with rigorous methodology, including proper control of confounding and an adequate TL measurement method, are still needed to determine the exact prognostic significance of TL for breast cancer patients.


شاهد الفيديو: Telomere Replication (سبتمبر 2022).